

| | | | | |
|---|
| | | Cell Culture Media, Kits, and Products Клетъчна култура Медии, комплекти, както и продукти | | |
Subculturing Cells - Cell Culture Subculturing клетки - клетъчна култура
Cell Culture Клетъчна култура
Cell Subculture Protocol Мобилен субкултура Протокол
SUBCULTURING CELLS SUBCULTURING клетки
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; Вземете DMEM медии 4C; трипсин-20; BSA-20; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic Сложете в 36mL на DMEM в коничен пластмасова туба Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; Добави 4mL на BSA медиите да 36mL DMEM; Get syringe and filter; Получаване на спринцовка и филтър; Suck up media with syringe. Add filter. Суча до медиите с спринцовка. "Добавяне на филтър. Push out media through filter on syringe. Натиснете "в медиите през филтъра на спринцовка. Repeat twice to get all of volume. Повторете два пъти, за да получите всички обем. Put into new plastic tube conical. Пуснати в новата пластмасова туба коничен. Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) Премахване на старите медии от дъмпинг в beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (получите заразяване!) Add 3mL typsin to culture. Trypsin with pull cells off the culture container. Добави 3mL typsin на културата. Трипсин с издърпване клетки от култура на съда. Put container into incubator. Wait 2 min; Take out; look into microscope. Сложете съда в инкубатор. Изчакайте 2 мин; вземат; гледам в микроскоп. Try to get less clumps. More individual cells. Опитайте се да получите по-малко clumps. Повече отделни клетки. Remove most of trypsin by dumping into beaker. Премахване на по-голямата част от трипсин от дъмпинг в beaker. Put back into incubator. Поставете обратно в инкубатора. Check frequently. Ако често. Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. Шамар на съда бе да се провери дъното за по-малко clumps; гледам в микроскоп. When see many individual cells floating along; Great! Когато видите много отделни клетки, плаващи по протежение; Велики! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). Добавяне на медиите за големи контейнери; 1:5 / 1:3 разреждане (3-5 големи контейнери). Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. Добавете към 10mL (T75) голям контейнер, 5 ml до (T25) малък контейнер. Suck out Most (5mL of cells from T25). Суча повечето (5 ml от клетки от T25). Add to T75. Добави към T75. Leave some cells in small container. Add media to small container. Check in microscope for single cells; Incubate in 37C incubator. Оставете някои клетки в малки съда. Добави медиите за малки контейнера. Ако през микроскоп за единични клетки; Incubate в 37 инкубатора. See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . Вижте други Cell-протоколи на нашия клетъчна биология и клетъчна култура протокол Directory.