محلات بين الخلاياجسمعلم نبات كيمياء مصدّ عاديّ مصدّ [ألفبتيك] [بووكستور] خلية علم الأحياء وثقافة هلام إستشراد علم نسيج [ميكروأرّس] علم مناعة [مسّ سبكترومتري] علم الأحياء الدقيقة تمثيل جزيئيّ هضميد بروتين [ميكروأرّي] رقاقات [بكر] [رل-تيم] [بكر] [رني] و [سرنا] جذر خلية علم الأحياء [ترنسفكأيشن] لطخة غربيّة |
مستعمل لونلونيلوني[بووكمرك] علم مواد
|
||||
ينال [هيغقوليتي], [رنا] مصونة الأولى وغالبا الخطوة حرج أكثر في ينجز كثير أساسيّ جزيئيّ علم الأحياء تجربة, بما في ذلك تحليل شماليّ, [نوكلس] حماية فحوصات, [رت-بكر], [رنا] يخطّط, ترجمة [إين فيترو] و [كدنا] مكتبة بناء. أن يكون ناجح, مهما, ال [رنا] عمليّة عزل إجراء سوفت تضمّنت بعض [ستبس] مهمّة كلا [بفور ند فتر] الحقيقيّة [رنا] تطوير.
[دبندينغ ون] ال [رنا] أن يكون استخرجت, هناك خاصّيّة ال [رنا] أنّ يسمح هو أن يكون عزلت بعيدا من أخرى [متريلس] خلويّ مثل بروتينات, [دنا] وحتّى أدهان.
رسول يحتوي [رنا] أو [مرنا] إمتداد [أدنوسن] بقيّة [إين ث فورم وف] مبلمر ([ا]) ذيل. استغلّت هذا يتلقّى يكون أن يسمح [مرنا] أن يكون حددت إلى مبلمر ([ت]) انجذاب عمود أو خرزة.
استمرّت إن أنت حاليّا تتلقّى يفضّل طريقة ل يعزل [رنا], أن يستعمل هو.
إن أنت يتلقّى لم تعزل [رنا] من نظامتك قبل أن وليس كائن حيّك على القائمة ميلان إلى جانب تالي, نحن يستطيع ساعدت أنت عيّنت يؤسّس بروتوكولات أنّ يتلقّى يكون استعملت ل يعزل [رنا] لشماليّ يلطّف أو [رت-بكر] من نظامتك. سينتج هذا أنواع البروتوكولات أيضا "[ميكروأرّ-غرد]" [رنا].
دائما ركضت [أغروس] هلام من [رنا] ك أن يقدّم النوعية.
بطاقة: إن أنت تستعمل غير عمود يؤسّس تطوير كاشف مثل [تريزول] نحن نوصي أنت يعجّل [رنا] ك [سكند تيم] من إيثانول أو يمرّ أنت هو من خلال [رنسي] عمود أو أداة مماثلة. يرى هذا يؤمّن إزالة من كلّ ملوّث عضويّة (طيف أدناه).
يرى فعّالة نوويّة/تجزئة حشويّة يستطيع كنت سريعا قدّمت ب يشوّش [أغروس] هلام تحليل (رقم 1). نطق [كرّسبوند-ينغ] إلى مبشّر [رّنا] سوفت كنت معادلة في الإجماليّة ونوويّة [رنا] كسر. ال [18س] و [28س] [رّنا] سيكون نطق أقلّ شديد في النوويّة [رنا] كسر من في إمّا مجموعة [رنا] أو حشويّة كسر [رنا]. في بعض [سلّ لين], مثلا 293 و [كس-7] خلايا, سيكون هذا فرق مثير, غير أنّ في أخرى خلايا خطوط مثل خلايا [هلا], ال [رّنا] نطق [أنلي سليغتلي] أقلّ شديد في [رنا] نوويّة من في إجماليّة أو حشويّة كسر [رنا]. "
[أ260] ليس قراءات و260/280 نسب كافي أن يضمن [هي بوريتي] [رنا]. أنت ينبغي أخذت يشبع طيف [أوف]. تحت 3 مثال طيف أيّ كلّ يتلقّى جيّدة 260/280 نسب, غير أنّ يتلقّى نقاوة مختلفة جدّا. أنت يستطيع أيضا استعملت ال 260/230 نسبة أن يساعد حدّدت المبلغ من تلوث عضويّة في [رنا] ك. هو كثير أكثر رقم متغيّر من ال 260/280 نسبة, غير أنّ عموما, يشير نسب فوق 1 نقاوة جيّدة.
غسلت خلايا كان بعد ذلك في [ببس] وعلى التّوالي استخرج بما أنّ يوصف. أولى, استخرجت خلايا كان مع [نونيدت] [ب-40] مصدّ (10 [مّ] [تريس-كل], ([ف] 7.5), 10 [مّ] [نكل], 3 [مّ] [مغكل2], 0.5% ([ف/ف]) [نونيدت] [ب-40], 40 [أونيتس/مل] [رنسن], 1 [مّ] [دتّ]). غسلت الكريّة طينيّة متبقّي ([رتيكلوم] خشن جبلويّ داخليّ ([رر]) ونواة) كان في ال نفسه مصدّ واستخرجت في مصدّ [ب] (10 [مّ] [تريس-كل] ([ف] 7.5), 10 [مّ] [نكل], 0.5% ([ف/ف]) [نونيدت] [ب-40], 40 [مّ] [إدتا], 40 [أونيتس/مل] [رنسن], 1 [مّ] [دتّ]). غسلت الكريّة طينيّة متبقّي نوويّة كان في ال نفسه مصدّ واستخرجت مع عال ملف مصدّ (10 [مّ] [تريس-كل] ([ف] 7.5), 0.5 [م] [نكل], 3 [مّ] [مغكل2], 0.5% ([ف/ف]) [نونيدت] [ب-40], 40 [أونيتس/مل] [رنسن], 1 [مّ] [دتّ]). صفّيت [رنا] كان من كلّ كسر ب ال [رنا] [ستت] حلّ. عزلت [رنا] إجماليّة كان يستعمل ال [رن-ستت60] كاشف ([تل-تست]) وفقا ل التعليم يزوّد بالصاحب مصنع. (مرجع: [بيونغ-شرل] [جنغ] [إت ل]., 2002)
ل 100 [ملس] 200 [ملس]
4. [5م] [غنيدينيوم] ثيوسيانات 53.2 [غ] 106.4 2% [ن-لورولسركسن] ([سركسل]) [2.0غ] [4.0غ] [50مّ] [إدتا] [0.5م] 10 [ملس] 20 [ملس] [25مّ] [تريس-هكل], [ف] 7.5 [1م] 2.5 [ملس] 5 [ملس]
0. [1م] [ب-مركبتوثنول] [700ول] [1.4ملس]
0. 2% مانع [ا] ([سغما]) 200 [أول] 400 [أول]
5. 7 [م] [كسكل] [كشيون] حجم نهائيّة 100 [مل]
5. 7 خبز [م] "" [كسكل] [95.8غ]
0. [1م] [إدتا] [0.5م] 20 [ملس]
* استعملت [دبك] يعامل ماء ويخبز آنية زجاجيّة. هذا حلّ, إطلاقا, إيجابيّا ينبغي كنت [رنس] مجّانا. [رنس] في كلّ مكان! ارتديت قفازات, إستعمال فقط يخبز آنية زجاجيّة, أو بلاستيك بتول. [دبك] متعة ماءك, مصدّ (ماعدا [تريس]). جدّا حريص.
1. وزنت حي. أزلت جهاز (كبدة), ثاقلت واحدة من الشعارات متفوّق [كدنا] أنت يقلّد المورثة تعبيد ب يختار جهاز أنّ فقط عبّر عن محلة وحيدة من [مولتيلوكس] أنزيم. 2. تجانست نسيج بسرعة في "حالة فوضى" مصدّ ([9ملس]) 3. فتلت [هوموجننت] في 12 [كغ] أن يزيل مادة غيرقابل للحلّ 4. بينما [هوموجننت] يكون يفتل [4ا]. [ويغت ووت] 1.8 [غ] من [كسكل] ([0.2غ/مل]) لكلّ عيّنة. [4ب]. أضفت في ال [أولتر-سنتريفوج] أنبوب ("[قويك-سل]") [3.5ملس] من [5.7م] [كسكل] "وسادة" هذا طبقة ينبغي كنت [رنس] مجّانا. أنت ستطرد [رنا] ك من خلال هذا طبقة وسيسبّب أيّ تلوث خسائر هامّة. 5. أزلت [سوبرننت], يضع داخل أنبوب طازجة, أضفت 1.8 [غ] [كسكل] 6. أضفت بعناية, [هوموجننت] [أن توب وف] [كسكل] وسادة. هذا أكثر باستعداد بارعة ب يستعمل [10كّ] محقنة وإبرة طويلة. وضعت إبرة/محقنة داخل [قويك-سل] أنبوب, وأضفت نسيج [هوموجننت] إلى المحقنة. سينضّ [هوموجننت] ببطء داخل [ق-س] أنبوب, يعوم [أن توب وف] الوسادة.
7. بعناية, تلاءم ميزان أزواج ال [سنتريفوج تثب] (+/-0.005[غ]).
8. تلاءم [سل تثب], مكان أنبوب ضد من بعضهم بعضا وغطاء مع أحمر ألومنيوم أعالي.
9. نابذة, 50,000 [ربمس] 5.5 [هر], [20وك]
بعد طرد مركزيّ: علّبت أنبوب حيث كريّة طينيّة سوفت كنت: على الجانب سفليّة خارجيّة ([رلتيف تو] مركز الدوّار)
10. أزلت أنبوب, وضعت في من ملائمة.
11. شرّحت من الأعلى الأنبوب. سفطت من العلويّة 2/3- 3/4 من حلّ. عملت من الأعلى إلى أسفل. هو مهمّة أنّ يسفط أنت من الفرعة حذاء كثير حلّ أولى ويزيل كلّ غير أنّ الوسادة واضحة. لا يسفط الكريّة طينيّة خفيّة في القعر.
12. توقّفت العلويّة 2/3 من أنبوب. [بيبت] يستعمل "يسحب" [بستيور], بعناية أزلت حلّ متبقّي. سيكون الكريّة طينيّة على ال [بوتّوم-سد] من الأنبوب.
13. شطفت كريّة طينيّة مع 70% [إتوه], أزلت ([بيبتس] إستعمال [بستيور]), كرّست مرّتين (مجموعة 3 يغسل)
14. أضفت 200 [أول] من [0.1إكس] [ت] ([رنس] حرّة), يستعمل ال [بيبت] طرف أن يسحق كريّة طينيّة و" يعاير" [ت.] محاولة أن يضع كريّة طينيّة داخل حلّ. على الأقلّ شكّلت حلّ متغاير عنصر ووضعت داخل طازجة [ميكروفوج] أنبوب.
15. كرّست مع 200 [أول] من [ت.] يشارك كلا حلّ
16. لا يحبّ دوّامة, [رنا] جيّدة أن يذهب داخل حلّ. صبر فضيلة.
17. حدّدت تركيز, 10 [أول] داخل 490 [أول] (500 [أول] [فول] نهائيّة)
18. أضفت أزلت 1 [تو] 2 [أوغ] من [رنا] لهلام تحليل ([رنا] تحميل مصدّ)
19. أضفت 1/10 حجم [رنس] مجّانا [3م] [نوأك] (40 [أول]), 2.5 حجوم [إتوه] ([1.0مل]). مزاج بشدّة.
20. أنت يستطيع حسبت التركيز ال [رنا] في ال [إتوه.ثوس], هناك ما من حالة أن يعجّل كلّ من [رنا] ك فورا. فقط أزلت حوالي 1.5 [تو] 2 أوقات المبلغ أنت تحتاج ب [فورتإكسينغ] [إتوه/رنا] حلّ وأزلت الحجم مناسبة. هذا [إتوه/رنا] يخفّض حلّ يخزّن في [20وك] أو, ثابت لسنون.
رأيت:
طقطقت ل كثير هنا: علم أخبار