[بيوينفورمتيكس] ، بروتوكولات ، [دنا] [رنا] بروتين [بروتيوميكس]

كفلت/أعلنت & اقترنت إلى نا & اتّصل بنا & حول نا & ساعدتنا

بيتيّ>[نورثرن-بلوت] [رنا]>>[إيندإكس.فب]

[تلو] [تلو2]

ترحيب إلى محطة جزيئيّة!

أنت يضطرّ سجّلت قبل أن أنت يستطيع عيّنت على ساحاتنا أو استعملت سماتنا متقدّمة. سجل الآن! ه حرّة وسريعة!

سابقا يسجّل ؟ [لوجن] الآن أدناه.

مستعملة اسم:

كلمة سرّ:

نسي سابقا يسجّل وكلمت سرّك ؟ طقطقة أدناه أن يستردّ هو.

استردّت كلمة سرّ ضائعة

تلاقيت الآن - هو سريعة وحرّة!

محطة جزيئيّة ال [لرج نتوورك] من باحثات ، عالمات وعلم عاشقات في أيّ مكان!

علم الأحياء جزيئيّة - علم إقتباسات

علم ، أساسيّا ، حقّا [أنتي-ينتلّكتثل]. هو دائما يرتاب سبب صافية ، ويطلب الإنتاج من حقيقة موضوعيّة. يفيد [ه.ل.] [منكن] ، أقلية: [ه.ل.] [منكن] [نوتبووك] ، 1956

جزيئيّة علم الأحياء الرسالة الإخباريّة!

نعم! أنا أريد أن يعلم المتأخّرة في جزيئيّة علم الأحياء وبحث! رجاء جعلتني خبيرة في ي مختبرة عمل!
أيضا يريد أنا أن يقول صديقاتي أن يحصل ي حرّة [بكر] فصل رجاء! 
لا يقلق بريد إلكترونيّك آمنة مع نا. نحن نكره [سبم] مثل كثير بما أنّ يتمّ أنت. 
[فيرست نم]:
بريد إلكترونيّ:

أخيرة ساحة موقعات

 

لطخة شماليّة

حقّ نشر 2007 - محطة جزيئيّة

وسائل سمعيّةجزيئيّة علم الأحياء وسائل سمعيّةيستمع إلى مفصّلة شماليّة لطخة شرح!

تاريخ من شماليّة يلطّخ

شماليّة يلطّخ [رنا] يلطّخ تقنية أيّ كان طوّرت في 1977 ب [ألوين] [إت ل]. في [ستنفورد ونيفرستي] (مرجع: 1). هو كان عيّنت بعد الجنوبيّة لطخة تقنية أيّ يلطّخ ل [دنا] ، يخترع بأدوين [م.] جنوبيّة في 1975. لطخة غربيّة ، طريقة ل يلطّخ لبروتينات أيضا لعبة على اللطخة جنوبيّة يعيّن وكان عيّنت في 1981 (مرجع: 2).

[بكغرووند ينفورمأيشن] - شماليّة لطخة تقنية

تحليل شماليّة على الرغم من عمره في العالم ذو تكنولوجيا عالية من [بكر] [رل-تيم] ، [نوكلس] حماية فحوصات ([ربس]) و [ميكروأرّس] ، بعد ال [غلد-ستندرد] للكشف وإكمام من [مرنا] مستويات. هذا لأنّ شماليّة لطخة تحليل يسمح مقارنة مباشرة من الرسول [رنا] وفرة بين عينات على غشاء وحيدة.

في لطخة شماليّة الفرق رئيسيّة بين الأخرى يلطّخ تقنيات أنّ [رنا] العاملة يكون يكشف. أيضا ، واجبة إلى الحقيقة أنّ [سنغل-سترندد] [رنا] عادة ، هو يخلق بنى معقّدة ثانويّة أيّ يأثر هجرته وبالتّالي يشوّه شروط يكون استعملت أن يركض الهلامات (بخلاف جنوبيّة).

[رنا] فصلت خارجا ب [رنا] هلام إستشراد (عادة [أغروس] هلام إستشراد) ، إنتقال لاحقة إلى غشاء ، تهجين مع تحقيق ، وأخيرا كشف.

لطخة شماليّة

 

 

بالمثل إلى جنوبيّة يلطّخ ، التهجين تحقيقات يمكن كنت [دنا] أو [رنا] في شماليّة يلطّخ.

استعملت [فرينت] من الإجراء يعرف كاللطخة عكسيّة شماليّة كان أحيانا (رغم أنّ ، بندرة). في هذا إجراء ، الطبقة سفليّة [نوكليك سد] (أنّ يكون لزّقت إلى الغشاء) يكون تجميع من يعزل [دنا] [فرغمنتس] ، والتحقيق [رنا] يستخرج من نسيج و [رديوأكتيفلي] يعلم.

الإستعمال من [دنا] [ميكروأرّس] أنّ قد [كم ينتو] إستعمال واسع انتشار [إين ث لت] تسعينات و [2000س] مبكّرة أكثر مجانسة إلى الإجراء عكسيّة ، داخل أنّ يتضمّن هم الإستعمال من يعزل [دنا] [فرغمنتس] يلزّق إلى طبقة سفليّة ، وتهجين مع تحقيق يجعل من [رنا] خلويّة. لذلك الإجراء عكسيّة [, ثوو] أصلا غيرمألوف ، يمكّن ال [أن-ت--تيم] دراسة من مورثة تعبير يستعمل تحليل شماليّة أن يتطوّر داخل مورثة تعبير يرسم ، في أيّ كثير (من المحتمل كلّ) من المورثات في كائن حيّ يمكن يتلقّى تعبيرهم [مونيتور]

تطبيقات من اللطخة شماليّة

أبطلت لطخات شماليّة يتلقّى يكون في كثير مناطق ب [بكر] [رل-تيم] ومقاربة [ميكروأرّي]. هو ليس [أفتن وسد] لسريريّة أو أغراض تشخيصيّة.

الشماليّة لطخة استعملت بروتوكول وتنوعاته مهما في جزيئيّة علم الأحياء بحث أن:

سيئات من شماليّة يلطّخ

يتضمّن السيئات من يستعمل شماليّة يلطّخ:

ميزات من شماليّة يلطّخ

يتضمّن الميزات من لطخات شماليّة:

شماليّة لطخة بروتوكول

بما أنّ يذكر يتضمّن ال [ستبس] في شماليّة يلطّخ:

  1. [رنا] عمليّة عزل
  2. هلام إستشراد ال [رنا] لفصل
  3. إنتقال إلى غشاء (عادة إيجابيّا حمّلت يحمّل نيلون ك [رنا] سلبيّا)
  4. [كروسّ-لينكينغ] ال [رنا] إلى غشاء (عادة ب [أوف-كروسّلينكينغ] أو مادّة كيميائيّة [منس])
  5. تهجين
  6. كشف

[متريلس] احتاجوا لشماليّة لطخة بروتوكول

مصد وصفات

[20إكسسّب] (500 [مل])
فسفات مصد [ف7.0] ([500مل])
تهجين مصد [هب] ([100ملس])

 

* يضيف [ريغت] قبل يستعمل [1000وغ] يشوّه [رنس] مجّانا [كت] [دنا] (حرارة إلى [95و] ل 3 [مين] أن يشوّه) [5000وغ] خميرة [رنا]

 

غسل: [2إكس] [سّب]+0.1% [سدس] (500 [ملس]) 50 [ملس] [20إكس] 5 [ملس] 10% [سدس] 0.1% [سدس]

مصد جارية ل [رنا] هلام ([1ل])
[رنا] هلام ([70مل])

[رنا] عينات للطخة شماليّة

يرى [رنا] عمليّة عزل وتطهير

[رنا] هلام

بعد يعزل [رنا] ، ال [رنا] ينبغي كنت فصلت خارجا على هلام (عادة [أغروس]).

يرى [رنا] هلامات

شماليّة لطخة إنتقال إلى من نايلون غشاء بروتوكول

غسلت بعد يركض ال [رنا] هلام ، الهلام مع [ديستيلّد وتر] يوضع على [بوسبلوتّر].

طبقات من أعلى إلى قعر:

يتأكّد مشبك فوق وهناك ختم صوف جيّدة. استعملت 75-80 [مّ] [هغ] من ضغطة ل 1 [هر] أو أكثر.

لطّخت غشاء جافّة

[كروسّ-لينكينغ] أغشية من نايلون - شماليّة لطخة بروتوكول

[بر] تهجين للطخة شماليّة

  1. [بر] هجّنت ل 6 [هوورس-وفرنيغت]
  2. ثبتت فرن إلى [65ك] حرارة [هب] مصد أن يضع [سدس] في حل
  3. لففت فوق غشاء في قطعة الشبكة ووضعت داخل [هبريديزتون] أنابيب ([2إكس] [سّب/0.1سدس])
  4. فحصت ل [أير بوبّل]
  5. وضعت أنابيب في فرن يوازن مع آخر أنابيب على جانب مضادّة

يعلم تحقيق لشماليّة يلطّخ

  1. وضعت [25نغ] من تحقيق في حجم إجماليّة [11ول] مع [دّه2و]
  2. شوّهت @ [95ك] 3 [مين.]. هذا أن يحصل التحقيق وحيدة يجنح وأزلت بنية ثانويّة أيّ منع تهجين فعّالة.
  3. بسرعة بررت على جليد مبلّلة. هذا أن يحافظ التحقيق وحيدة يجنح ، حرّة من بنية ثانويّة ولا سمحت [رنّلينغ] (أو يصلح من بنى ثانويّة).
  4. أضفت [4ول] عاليا أوّليّة ([بوهرينجر] [منّهيم]) [5ول] ألفا [رديولبلد] [ب-32] [دكتب] [3000وس/مّول] [20ول] مجموعة
  5. حضنت 10-15 [37ك] [مين]
  6. أضفت [28ول] من [1إكس] [ت] ، [2ول] [0.5م] [إدتا] ، إلى [20ول] ردّ فعل.
  7. [بر-سبين] [غ-25] [سفدإكس] عمود ل 1 دقيقة.
  8. أضفت [50ول] عينة إلى عمود وفتلت ل 2.5 [مين] في نابذة سريريّة. هذا أن ييصفّي تحقيق بعيدا من علامة مميّزة.
  9. رمي بعيدا عمود.
  10. مزجت في جديدة أنابيب [100وغ] [كت-دنا] [50وغ] خميرة [رنا] في [0.5مل] أنابيب.
  11. شوّهت 95° 3 [مين]
  12. أضفت إلى هجينية أنابيب مزيج ، هجّنت في [65ك] ل 20-36 [هر]

عيّنت تهجين بروتوكول لشماليّة يلطّخ

هجّنت ل 36-48 ساعات بعد ذلك [وش.].

  1. سخّنت فوق [2إكس] [سّب/0.1] [سدس] (غسل) حرارة حتّى 65° [ك] (إستعمال موجة دقيقة أو [وتر-بث] أن يسخّن حل)
  2. أخذت خارجا أنابيب وصببت سائل داخل حارّة إشعاعيّة نفاية وعاء صندوق.
  3. يتمّ عمليّة شطف مع [10مل] غسل هذا مرّتين ويصبّ نفاية خارجا.
  4. يضع في 40 [تو] 50 [ملس] من غسل وهزّة [فيغورسلي].
  5. يضع في تهجين فرن ل 20 [مين] يدور.
  6. صببت نزولا إلى بالوعة
  7. آخر [40-50ملس] وهزّة في فرن.
  8. صببت خارجا إلى [وست كنتينر] (بالوعة [إيف نوت] حارّة أو مسمّة) وتأكّدت هو [نو لونجر] حارّة وبعد ذلك يأخذ خارجا غشاء.
  9. غسلت على رجّاجة مع [0.2إكسسّب] مع 0.1% [سدس] في [رت] ل 15 [مين.].
  10. [أير دري]
  11. مادّة استهلاكيّة

 

أطراف للطخة شماليّة

استمرّت إن أنت حاليّا تتلقّى يفضّل طريقة ل يعزل [رنا] ، أن يستعمل هو.

دائما ركضت [أغروس] هلام من [رنا] ك أن يقدّم النوعية. ليس فحسب اعتمدت على قياس طيف نتيجات.

* استعملت [دبك] يعامل ماء ويخبز آنية زجاجيّة. هذا حل ، إطلاقا ، إيجابيّا ينبغي كنت [رنس] مجّانا. [رنس] في كلّ مكان! ارتديت قفازات ، إستعمال فقط يخبز آنية زجاجيّة ، أو بلاستيك بتول. [دبك] متعة ماءك ، مصدات (ماعدا [تريس]). جدّا حريصة.

 

يتحرّى لطخات شماليّة

استمرّت إن أنت حاليّا تتلقّى يفضّل طريقة ل يعزل [رنا] ، أن يستعمل هو.

 

تناقشت وعيّنت أسئلة حول هذا في الشماليّة لطخة ساحة.

شماليّة لطخة مراجع

  1. [ألوين] [جك] ، [كمب] [دج] ، [غر] شديدة (1977). "يهلّم طريقة لكشف من [رنس] خاصّة في [أغروس] بإنتقال إلى [ديزوبنزلوإكسمثل-ببر] وتهجين مع [دنا] يسبر". [بروك]. [نتل]. [أكد]. [سكي]. [أو.س.] 74 (12): 5350-4.
  2. [و.] نيل [بورنتّ] (أبريل - نيسان 1981). ""غربيّة يلطّخ": [رديويودينتد] إنتقال استشراديّ بروتينات من [دودسل سولفت] - [بولكرلميد جل] إلى [نيتروسلّولوس] [أونموديفيد] وكشف تصويريّ إشعاعيّ مع جسم وبروتين [ا]". [بيوشم] شرجيّة 112 (2): 195-203.


عرض ، مشترى وخداع على [إبي] تنازل/[ترم وف سرفيس] & [بريفسي بوليسي]& [ريغتس] ©2005-2007 Station.com جزيئيّة ، كلّ متحفّظة.

أرسلت إلى صديقة أرسلت هذا صفحة إلى صديقة

Français Español 日本語 [أربيك] Italiano Deutsch 汉语 漢語 Nederlands 한국어 PortРусско
Ελληνικά Swedish Indo Romanian Polish Norwegian Hindi Finnish Danish Czech Croatian Bulgarian English - Original language