يصف هذا بروتوكول طريقة أن يقدّم تركيز من كالسيوم حرّة حشويّ, [[ك2]] أنا, في يستنبت لزجة خام 264.7 خلايا, يستعمل 96 بئر لوحة شكل. أنجزت هذا هدف ب يستعمل ال [ك2-سنستيف] صبغ لاصفة, [فلوو-3], أيّ ينفذ خلية أغشية كإستر ويكون حلمأت في الخلية إلى ه [ك2-سنستيف] شكل حامضيّ. - [يقرأ فحص من كالسيوم بين الخلايا حرّة في خام 264.7 خلايا]
يصف هذا بروتوكول طريقة أن يقدّم تركيز من كالسيوم حرّة حشويّ, [[ك2]] أنا, في يستنبت لزجة خام 264.7 خلايا, يستعمل 96 - جيّدة لوحة شكل. أنجزت هذا هدف ب يستعمل ال [ك2-سنستيف] صبغ لاصفة, [فلوو-3], أيّ ينفذ خلية أغشية كإستر ويكون حلمأت في الخلية إلى ه [ك2-سنستيف] شكل حامضيّ. قست لصف للخلايا لزجة على وقت ب يستعمل قعر يقرأ من 96 بئر لوحة, مع خلايا أنّ يتلقّى يكون غسلت. - [يقرأ فحص من كالسيوم بين الخلايا حرّة في خام 264.7 خلايا يحمّل مع [فلوو-3] بروتوكول]
يصف هذا بروتوكول طريقة أن يقدّم تركيز من كالسيوم حرّة حشويّ, [[ك2]] أنا, في يستنبت لزجة خام 264.7 خلايا, يستعمل 96 - جيّدة لوحة شكل. أنجزت هذا هدف ب يستعمل ال [ك2-سنستيف] صبغ لاصفة, [فور-2], أيّ ينفذ خلية أغشية كإستر ويكون حلمأت في الخلية إلى ه [ك2-سنستيف] شكل حامضيّ. - [يقرأ فحص من كالسيوم بين الخلايا حرّة في خام 264.7 خلايا يحمّل مع [فور-2] بروتوكول]
4 استعملت إجهادات ال [إ.] [كلي] في هذا دراسات: [جم101] ل [م13] تلوث وعمليّة عزل, [إكسل1بمرف'فور] [م13] أو [بوك-بسد] [دنا] تحويل, و [إد8767] ل [كسميد] [دنا] تحويل. أن يبقي هم شخصيّة [ف'] [إبيسم] ضروريّ ل [م13] تلوث فيروسيّة, [ستركد] [جم101] على صباحا 9 أدنى أوساط لوحة و [إكسل1بمرف'] [ستركد] على [لب] لوحة يحتوي تترسكلين. [إد8767] [ستركد] على [لب] لوحة. حضنت هذا لوحات في [37دغك] بين عشيّة وضحاها. ل كلّ إجهاد, 3 [مل]. من سائل مناسبة. - [يقرأ جرثوميّ خلية صيانة بروتوكول]
[بروتوكل] لاستنساخ مورثات من مكتبة [فج]. يتضمّن: عيار ولوحة خارجا [فج]; رفعت لوح معدنيّ على مرشّح وأعدّتهم لغربلة; جعلت تحقيق; هجّنت التحقيق إلى المرشّح; غسلت المرشّح ومادّة استهلاكيّة أن يصوّت; صفّيت لوح معدنيّ [بوتتيف]; قطعت [بلسميد] من ال ب رغب [فج]. - [يقرأ أنسوخ مورثات من [فج] مكتبة بروتوكول]
دفق فحوصات عرض تصوّر من خلية التصاق تحت جدار قصير إجهاد. تصوّر من الحادث مختلفة من خلية التصاق يستطيع كنت كمّلت بانتقائيّة صورة اكتساب ولاحقة صورة يعالج. دفق تناسبت فحوصات لحادث لصوق أيّ يقع جدّا بسرعة في وقت مقياس قصيرة من أنّ من كثير ساكن إستاتيكي التصاق فحوصات. أيضا, حادث لاحقة إلى الحادث أوّليّة يستطيع كنت درست مثل خلية تثبيت و [سبردينغ] يعطي بعض تبصر داخل العلم حركة ال [سلّ-سلّ]. - [يقرأ حركيّة دفق فحص لخلية التصاق في موازية لوحة دفق غرفة]
دفق يسمح فحوصات تصوّر من خلية التصاق تحت [ولّ-دفيند] جدار قصيرة إجهاد. كمّلت تصوّر من الحادث من خلية التصاق بانتقائيّة صورة اكتساب وصورة يعالج. حادث لاحقة إلى الحادث أوّليّ يستطيع كنت درست مثل خلية تثبيت و [سبردينغ]. جون [ت.] [بتّونغلكتش] [كربورأيشن], روكفيل, مريلاند - [يقرأ حركيّة دفق فحص في موازية لوحة دفق غرفة]
بروتوكول ل ال [إلكتروبورأيشن] من [إس] خلايا. عبر خلايا برتابة اثنان أيام قبل [إلكتروبورتينغ]. عادة واحدة 10 [كم] سيزوّد لوحة في تقريبا 80% [كنفلونسي] بما فيه الكفاية خلايا ل 1-2 [إلكتروبورأيشن]. - [يقرأ [إلكتروبورأيشن] من [إس] خلايا بروتوكول]
يبدأ كثير معالجة مع [م13], بما في ذلك تحضير من مخزونات فيروسيّة وعمليّة عزل من [سنغل-] و [دنس] [دووبل-سترندد], مع ثقافة [سملّ-سكل] سائلة أنّ يكون أعديت مع [م13] لوح معدنيّ, يلتقط من [أغر بلت]. - [يقرأ ينمو ملتهم جراثيم [م13] في سائلة ثقافة بروتوكول]
بروتوكول لضخم خميرة تحويل. يتضمّن: خميرة خلية تحضير; مقياس كبيرة تحويل; إلى لوحة على [سليد مديوم]; أن ينتقي في سائل. - [يقرأ [لرج-سكل] خميرة تحويل بروتوكول]
فحص يقيس خلية حيويّة. هو اثنان لون لصف فحص أنّ في وقت واحد يحدّد حيّة خلية رقم وميّتة خلية رقم. صمّمت هذا بروتوكول لإستعمال مع ال [جميني] [إكسس] [ميكروبلت] [سبكتروفلوورومتر], [مولتي-ولّ] لوحة ماسحة مع ثنائيّة إثارة/إذاعة إمكانيات, غير أنّ الفحص أيضا قابل للتكيّف لدفق [ستومتري] ولصف مجهريّة. يتضمّن: خلية ثقافة; تحضير للفحص; يعيش/بلا جدال فحص; يقرأ اللوحة; [دتا نلسس]; بروتوكول بديلة. - [يقرأ حيّة/بلا جدال فحص لخلية حيويّة [بروتوك]]
خميرة إجهادات يمكن كنت خزّنت مطلقا في [لوو تمبرتثر] (- 80 درجة [ك]). قدّمت اثنان يحفظ طرق أدناه. في طريقة [ا], نمات الخلايا على لوحة, بينما في طريقة [ب] الخلايا يكون نمات في ثقافة سائلة. - [يخزن يقرأ [لونغ-ترم ستورج] الخميرة بروتوكول]
[لوسفرس] فحص 24 بئر لوحة ([برومغ] نظامة)- http://www.biochem.northwestern.edu/ibis/morimoto/research/Protocols/II.%20Eukaryotes/F.%20Luciferase%20Assays/2a.single%20luciferase.pdf
وحيدة يجنح [بلسميد] [دنا] عمليّة عزل بروتوكول يصف الإنتاج وعمليّة عزل من [سنغل-سترندد] [دنا] ([سّدنا]) يستعمل [بكتريوفجميد-كنتينينغ] جرثوم ومساعد [فج]. يسمح تلوث من ال [هوست سلّ] مع مساعد [فج] ل يعبّئ من [سّدنا] داخل ملتهم جراثيم. ال [سّدنا] يستطيع بعد ذلك كنت عزلت من جسيمات [فج].
بروتوكول للإنتقاء من أجسام [فج] يستعمل يجمّد مولّد. يصف هذا طريقة الإنتقاء الأجسام من ملتهم جراثيم جسم مكتبة أنّ يميّز مولّد خاصّ. ال [فج] عرض عرضت مكتبة من [أنتيبود-ديسبلينغ] جسيمات [فج] إلى مولّد يربط إلى طبقة سفليّة صلبة ([نونك] [إيمّونو] أنبوب). يقيّد الجسيمات [فج] مع انجذاب لمولّد إلى ال يجمّد مولّد وانتقيت من المكتبة ال [فج] عبّر عن أجسام.
بخلاف [فج] كرويّ, مثل [ت4] و λ, أيّ يتلقّى تقريبا يتماثل وزن نسب البروتين إلى [دنا], يتلقّى [فج] [فيلمنتووس] حوالي ستّة أوقات كثير بروتين من [دنا]; يسهم البروتين لذلك جوهريّا إلى ال [أبسربأيشن سبكتروم].
3 ' ينهي تضخيم سريع [كدنا] جنس يستعمل [بكر] بروتوكول. يحتوي هذا بروتوكول ال [ستبس] ل 3 ' نهاية تضخيم سريعة [مرنا] ب [بكر]. ال [فيرست-سترند] اصطنعت [كدنا] من إجماليّة أو مبلمر ([أ]) [رنا] ب يشحن من الذيل [بول-ا] من ال [مرنا] يستعمل [أليغو] ([دت]) [أدبتور] كبسولة تفجير. ضخّم ال [كدنا] بعد ذلك عن طريق [بكر] يستعمل كبسولة تفجير [جن-سبسفيك] و[أدبتور] كبسولة تفجير.
يستنسخ هذا بروتوكول بروتوكول على كيف أن يلد [ترنسفكتد] جنيني جذر ([إس]) خلية. البروتوكول سابق في هذا [سري] البروتوكول ل [إلكتروبورأيشن] من [إس] خلايا. البروتوكول تالية في ال [سري] البروتوكول على تحلّل, توسّع, ويستنسخ يجمّد من [ترنسفكتد] [إس].
يصف هذا بروتوكول ال [إلكتروبورأيشن] من ال [بمه] 81-17 [موت] [س] إجهاد أنّ يكون أوصيت ل [ترنفورمأيشن] من الموقعة وجّه [موتجنسس] ال [دسدنا] (يرى بروتوكول على [ست-ديركتد] [موتجنسس] على [دنا] [دووبل سترندد]). [بمه] 81-17 [موت] [س] حالة عدم توافق إصلاح معيبة ([موت] [س]) [إسكهريشا كلي] إجهاد. زدت الاحتمال أنّ الاثنان تحوّل يريدون [كسغرغت] أثناء الدواء أولى من [دنا] جواب في هذا إجهاد.
يعطي البروتوكول إعتبارات عامّ للتصميم من يستهدف متّجه لفيران [ترنسجنيك]. يشارك البروتوكول طرف في التصميم من [نوك-ووت] و [نوك-ين] متّجه وبعض من إستراتيجياتهم ل ينتج [هومولوغوسلي] يعاد [ستم سلّ] جنيني.