يغطّي كثير غربيّة لطخة مشاكل ويتضمّن كثير حلول. زغبة نطق, منخفضة أو إشارة ضعيفة, [هي بكغرووند], بقع على فيلم, [توو مني] نطق. [مولكلرستأيشن] مرشد. - [يقرأ يتحرّى لطخة غربيّة]
[لكم] معزول خاصّة علا خلايا أو نساج من عيّنة على مجهر منزلق. شاهدت العيّنة من خلال فيلم لدن بالحرارة أنّ يكون ربطت إلى [ميكروسنتريفوج] أنابيب غطاء. يصهر يتمركز حرارة, يسبّب بالتطويق من ليزر ذبذبة, الغشاء إلى الخلايا الفائدة, أيّ يستطيع بعد ذلك كنت حصدت لتحايل بعيد. [رنا] وبروتينات يستطيع كنت صفّيت من ال يعزل خلايا, يسمح تحايل مفصّلة من مورث تعبير. قسمت هذا بروتوكول داخل ثلاثة مرحلة. - [يقرأ ([لكم]): تحضير ويقسم من مجمّد نسيج قالب وتطوير ال [رنا] من يعزل [سل]]
(بي [3-كينس]) نشاط فحص- http://www.upstate.com/misc/protocol_detail.q.prot.e.assay.a.name.e.Phosphatidyl_Inositol-3_Kinase_Assay_%28PI3%20Kinase%20Assay%29
[رفرس-ترنسكريبد] أن يلد "3 ' - نهاية" [كدنا] متحيّز يستنسخ, [مرنا] يستعمل "هجينية" كبسولة تفجير ([قتوتل], [قت]) أنّ يتألّف اثنان يمزج أسس ([غتك/غك] يتبع ب [[ت]] 17) وفريدة 35 حقيرة [أليغنوكليوتيد] تسلسل ([قي-قو]). أنجزت تضخيم بعد ذلك يستعمل مبتدأ يحتوي جزء من هذا تسلسل ([قووتر], [قو]) (أيّ الآن يقيّد إلى كلّ [كدنا] في ه 3 ' - نهاية) وكبسولة تفجير يستنتج من المورث الفائدة, [غسب1] (كبسولة تفجير [جن-سبسفيك] 1). - [يقرأ 3 ' - نهاية [كدنا] تضخيم يستعمل كلاسيكيّة جنس بروتوكول]
يستنسخ أن يلد "5 ' - نهاية" [كدنا] متحيّز يستعمل جنس كلاسيكيّة, ال [فيرست-سترند] أمنان ولدت بنسخة تسجيل عكسيّة (إمتداد مبتدأ) من يعرف كبسولة تفجير [جن-سبسفيك] ([غسب-رت]). بعد ذلك, مبلمر ([ا]) ألحقت ذيل يستعمل [ديوإكسنوكليوتيدلترنسفرس] طرفيّ ([تدت]) و [دتب]. تضخيم وفيت يستعمل ثلاثة كبسولة تفجير. - [يقرأ 5 ' - نهاية [كدنا] تضخيم يستعمل كلاسيكيّة جنس بروتوكول]
يغادر جنس جديدة, تنوّع من [رنا] [ليغس-مديتد-رس] ([رلم-رس]) ([ليو] و [غروفسكي] 1993) من جنس كلاسيكيّة (يرى 5 ' - أنهيت [كدنا] تضخيم يستعمل جنس كلاسيكيّة) داخل أنّ "مرساة" كبسولة تفجير ربطت إلى ال 5 ' - نهاية من ال [مرنا] قبل العكسيّة نسخة تسجيل خطوة; بالتّالي المرساة يصبح تسلسل يدمج داخل ال [فيرست-سترند] [كدنا] إن, وفقط إن, النسخة تسجيل عكسيّة يباشر من خلال الطول كاملة من ال [مرنا] الفائدة. - [يقرأ 5 ' - نهاية [كدنا] تضخيم يستعمل جديدة جنس بروتوكول]
بروتوكول يصف فحص حيث هو يتطلّب ينمو يشبع ثقافة الخميرة, يعدّ, و [سبوتّينغ] تخفيفات متسلسل خميرة على على حدّ سواء [كسم] و [كسم]+[6و] لوحات. - [يقرأ [6-زورسل] حساسيّة فحص لخميرة بروتوكول]
وحيدة يجنح [بلسميد] [دنا] عمليّة عزل بروتوكول يصف الإنتاج وعمليّة عزل من [سنغل-سترندد] [دنا] ([سّدنا]) يستعمل [بكتريوفجميد-كنتينينغ] جرثوم ومساعد [فج]. يسمح تلوث من ال [هوست سلّ] مع مساعد [فج] ل يعبر من [سّدنا] داخل ملتهم جراثيم. ال [سّدنا] يستطيع بعد ذلك كنت عزلت من جسيمات [فج].
[دنا] [ميكروأرّس] يمرّ ترحيب من [دنا] جزيئات متمّم إلى مورث الفائدة أنّ يكون "[سبوتّد]" بتجهيز شوغليّ على زجاج منزلق طبقة سفليّة. التعبير المورث في خلايا يستطيع كنت [مونيتور] مع [ميكروأرّس] ب يعدّ [كدنا] من ال [مرنا] الخلايا الفائدة ويقيس التهجين إلى ال [ميكروأرّي]. يصف هذا بروتوكول ال يعلّب من [دنا] [جنوميك] لإستعمال كتحقيق لتهجين إلى ال [كدنا] [سبوتّد] على الصفح.
[تثبولين] بلمرت داخل [ميكروتثبول] ب يحضن [تثبولين] في [37ك] مع [غتب]. تنوية أضفت بذرة عندما الغرض أن يعاير [ميكروتثبول] استطالة. [تثبولين] يستطيع أيضا كنت بلمرت لالغرض من يعيد ال [تثبولين] أو يعلّب ال [ميكروتثبول] مع [فلوورسنتلي] يعلّب [تثبولين]. يؤسّس على البروتوكول بتيموثي [ميتشسن] من [هرفرد ونيفرستي].
هذا [ميكروأرّي] بروتوكول يصف تحضير من لاصفة [دنا] تحقيقات من إنسانيّة [مرنا] بروتوكول الإنتاج التحقيقات يعلّب مع الاصباغ لاصفة, [س3] و [س5], يتبع التأليف ال [كدنا] من [مرنا] إنسانيّة والتهجين من التحقيقات إلى [دنا] [ميكروأرّس].