يجرب غربيّة لطخة أغشية

غشاء يجرب الإزالة الأجسام ([إينكلودينغ] أوّليّة وثانويّة) من غربيّة لطخة غشاء ، أن يسمح الحضانة من جديدة أوّليّ وأجسام ثانويّة للفحص من بروتين جديدة بغربيّة يلطّخ.

[أغروس] هلام استعملت إستشراد في الدّرجة الأولى في تحليل أو فصل من [دنا] و [رنا] جزيئات (رغم أنّ بروتينات يستطيع أيضا كنت فصلت على [أغروس] هلامات) ، ولكن فصل أيضا يسمح التطهير من حجوم خاصّة [دنس] بعد حصر أنزيم هضم. استعملت هذا عادة في يستنسخ أن ينال قطعة [بلسميد] ، في أيّ [أغروس] هلام إستشراد يفصل قطعة متجهات من غير مختصر أحد.

لذلك يسمح يجرب:

1. الاستعمال مكرّر من غربيّة لطخة أغشية أن يعاير ل آخر بروتين تعبير
2. إلى فحص ل [توتل بروتين]
3. أن يعاير للبروتين [نون-فوسفورلتد] (بعد يعاير لبروتين [فوسفورلتد]).

يجرب يتطلّب خاصّة مصدات وحضانة في فرن.

مصدات يستعمل:

يجرب مصد

• 62.5 [مّ] [تريس-هكل] ([ف] 6.8)
• 2% [سدس]. (أضفت 280 [أول] من 2 [مرسبتوثنول] [بتا] أو تركيز نهائيّة من 0.1 [م] [2-مكبتوثنول]).

• أضفت 280 [ل] من 2 [بت-مركبتوثنول] لكلّ 40 [مل] من يجرب مصد (إلى تركيز نهائيّة من 100 [مّ])
• 1. غسلت غشاء في [تبست] (1[إكس]5 [مين])
  2. استعملت حضنت غشاء في يجرب مصد ل 30 [مين] في [50-60ك] (تدفئة فرن ل هذا - وحافظت الفرن باب يغلق واجبة إلى رائحة)
  3. غسلت في [تبست] (2[إكس]5 [مين])
  4. سددت غشاء ل 1 [ه] في 5% يسدّ لبن
  5. تبعت بروتوكول عاديّة ل يطوّر لطخات غربيّة.