[بيوينفورمتيكس] ، بروتوكولات ، [دنا] [رنا] بروتين [بروتيوميكس]

علم الأحياء يصنع بروتوكولات بيتيّة [بيوينفورمتيك] علم الأحياء ساحات جزيئيّة علم الأحياء [إنسكلوبديا] جزيئيّة علم الأحياء صور [بووكمرك] نا!

بيتيّة>بروتين>[بروتين-بروتوكلس]>[وسترن-بلوتّينغ]>[إيندإكس.فب]

علم الأحياء جزيئيّة بيتيّة علم أخبار علم [فيديوس] [دنا] [رنا] بروتين [بروتيوميكس] بحث [بتا]! [بيوينفورمتيكس] مختبرة تجهيز جزيئيّة علم الأحياء تقنيات جزيئيّة علم الأحياء منتوجات وخدمات متّصلة علم الأحياء خطوات

علم الأحياء جزيئيّة [بلوغ]

أرسلت هذا صفحة إلى صديقة

محطات بين الخلايا

جسم علم نبات عاديّة مصدات مصدات [ألفبتيك] [بووكستور] خلية علم الأحياء وثقافة هلام إستشراد علم نسيج [ميكروأرّس] علم مناعة [مسّ سبكترومتري] علم الأحياء الدقيقة جزيئيّة تمثيل هضميد [بروتيوميكس] بروتين [ميكروأرّي] رقاقات [بكر] [بكر] [رل-تيم] [رني] و [سرنا] جذر خلية علم الأحياء [ترنسفكأيشن] لطخة غربيّة

لطخة غربيّة

 

غربيّة لطخة بروتوكولات

غربيّة لطخة ساحة

غربيّة لطخة منتوجات

غربيّة لطخة كتب

لطخة غربيّة يتحرّى

غربيّة لطخة كتب

 

غربيّة يلطّخ بروتوكول

[وسترن-بلوت] بروتوكول

تحضير العينات ل [سدس-بج] هلام إستشراد من يعدّ خلية [لستس]

1. أعدّت هلامات ل [سدس-بج]
2. أعدّت [1إكس] مصد جارية
3. أضفت 50 [مل] من [بت-مركبتوثنول] إلى 950 [مل] عينة مصد (ل 1 [مل]). (فقط إن أنت يتلقّى لم [بر-دّد] [بت-مركبتوثنول] إلى عينة مصد)
4. [بر-دترمين] أضفت عينة مصد إلى كلّ عينة ([هوو موش] عينة أنت يستطيع حمّلت لكلّ بئر - [بيورد] رقيقا مشاط يستطيع احتبست حول [30ول]. يستطيع مشاط كبيرة [أكّومت] حتّى [50ول]).
5. دوامة عينات بإيجاز.
6. دفعت فتحة بئر في غطاء من كلّ أنابيب (أن يمنع الأعالي يفرقع عندما يغلي)
7. غليان في تدفئة قالب/[وتر-بث] في ([95ك]) ل 5 دقائق (أبديت [لوور تمبرتثر] يتلقّى يكون أن يمنع [نون-سبسفيك] بروتين تراكم)

بعد يغلي بروتين عينات - تحميل ودوران ال [سدس-بج] هلام

1. طردت عينات ل 1 دقيقة في [هي سبيد].
2. حمّلت عينة داخل كلّ درب.
3. حمّلت [مو] ([مولكلر ويغت] سلم) مرجع. (أنت يمكن أردت
4. ركضت هلام في [100ف] ([100ف] من خلال يكدّس هلام ، جهد فلطيّ يستطيع كنت زدت حتّى [200ف] عندما يركض في يفصل هلام مع كثير من مصد جارية)

إنتقال من بروتين عينات إلى غشاء

1. أعدّت [1إكس] إنتقال مصد
2. نقعت وهززت هلام في إنتقال مصد ل 15 [مين]
3. نقعت [نيتروسلّولوس] غشاء (أو [بفدف]) و [فيلتر ببر] (بشكل غير عاديّ سميكة) ل عدّة دقائق.
4. وضعت سندويتش على إنتقال خلية:

إضافيّة سميكة [فيلتر ببر] فسحة
غشاء
هلام
إضافيّة سميكة [فيلتر ببر] أسود

5. إنتقال كهربائيّة: [35ف] [أفرنيت] أو [90ف] ل 1 ساعة [دبندينغ ون] الحجم من بروتينك أو صبرك!

غربيّة يلطّخ بروتوكول أو [إيمّونوبلوتّينغ]

1. أعدّت [1إكس] [تبست] من حلول مبتذلة.
2. أعدّت يسدّ مصد (3% [بوفين سروم] زلال أو 5% [بلوتّينغ-غرد] لبن ([بلوتّو]) في [تبست]). (أنت يمكن أردت أن يحاول عدّة مختلفة يسدّ أوقات وشروط).
3. غسلت غشاء في [1إكس] [تبست] مع يهزّ ل 10 [مين.].
4. قالب في [رووم تمبرتثر] ل 1 ساعة مع يسدّ مصد (يهزّ أو مدورة دائريّة)
5. يكيّف حضنت غشاءك ([بفدف] أو [نيتروسلّولوس]) مع أوّليّة 1° [أب] جسم بين عشيّة وضحاها (ل يصعب يلطّخ [إي] تحويل فسفوريّ البروتينات) أو 1 ساعة ل (يتيح شروط مثل [توتل بروتين]) في [4ك] ([أفرنيت]) أو [رووم تمبرتثر] (1 ساعة حضانة فقط) يغطّى مع [سرن] لفاف (لطيفة يهزّ). استعملت أنت يستطيع استعملت أحواض بلاستيكيّة من الدولار مخزن ل هذا (هذا فقط ل يلطّخ!) أو إستعمال ماصّة صندوق قعور. التخفيف لجسم أوّليّة حول 1:1000. يرى صاحب مصنع تعليمات.
6. غسلت مع [1إكس] [تبست] 3[إكس]15 [مين]
7. حضنت غشاءك ([بفدف] أو [نيتروسلّولوس]) مع جسم ثانويّة ، 2° [أب] ل 30 - 45 [مين] أو (1 ساعة - ل يصعب يلطّخ شروط) في [رووم تمبرتثر]. التخفيف لأجسام ثانويّة عادة 1:10,000 أو [هيغر]. يرى ([إي] [1ول] من ثانويّة في [10مل] من [تبست] لكلّ غشاء) صاحب مصنع تعليمات.  أنت يمكن أردت أن يضيف جسمك إلى يسدّ حل أن ينخفض التصاق [نون-سبسفيك] خصوصا إن أنت حصلت [هي بكغرووند] في تجربتك أولى.
8. غسل مع [تبست]   4-5[إكس]10 [مين.]. هذا ال أكثر مهمّة يغسل خطوة.
9. [إكل] ([5مين])
10. مادّة استهلاكيّة إلى فيلم. عادة انكشاف وقت من لطخات غربيّة حوالي 10-30 ثانية. طويلا (5-10 دقائق) لتحويل فسفوريّ. إن أنت تتلقّى إشارة ضعيفة حقّا ، إمّا يحتاج أنت أن يحمّل كثير بروتين أو محاولة أن يزيد انكشاف وقت ([أوب تو] 30 دقائق - أنت يستطيع حاولت يترك هو في شريط تسجيل طويلة).
11. حافظت غشاءك! أنت يستطيع حافظت غشاءك في [تبست] [1إكس] في البرّاد لفترة. أنت يمكن احتجت هو للأسباب تالي: 1) يفحص تحميل (مراجعات ورقيّة يمكن سألت ل [توتل بروتين] أو تحميل معيار مثل [أكتين]). أيضا ، أنت يستطيع سبرت في البداية ل [فوسفو-بروتين] وبعد ذلك جربت و [ربروب] ل [توتل بروتين].

أيضا يرى نا غربيّة يلطّخ غشاء يجرب بروتوكول