[بيوينفورمتيكس] ، بروتوكولات ، [دنا] [رنا] بروتين [بروتيوميكس]

بيتيّة>بروتين>[إيمّونوبرسبيتأيشن-بروتوكل]>[إيندإكس.فب]

ترسّب مناعيّ بروتوكول

ترسّب مناعيّ وبروتوكولات.

أساسيّة ترسّب مناعيّ بروتوكول [إيب]:

1. عاملت خلاياك

2. حصدت خلايا ب يضيف 500 [أول] من [سلوبيليز] مصد ، كشطت ومررت من خلال محقنة 21 مقياس إبرة [إكس5] أوقات أن يتجانس.

3. أوصلت [تك] ترسيب (سيستعمل هذا كنت أن يعدّل إن أنت [رديولبلد] الخلايا [إ.غ.] مع [س-35])

4. [بر-كلرينغ]: حضنت [بر-كلر] ب يضيف 2 [أول] من [إكس] ، فأرة أو أرنبة أو معزة مصل (حيث [إكس] يكون النوع حيوانيّة في أيّ الجسم أوّليّة كان رفعت) إلى عينات كاملة وفي مدورة ل 30 دقائق في [رووم تمبرتثر].

5. أزلت [إكس] مصل ب يحضن مع 30 [أول] [إيمّونوبرسبيتين] مع 30 دقائق دوران في [رووم تمبرتثر].

6. طردت عينات ل 3 دقائق في 13 ، 000 [ربم].

7. أضفت بعد طرد مركزيّ ، 5 [أول] من جسم أوّليّة ([إكس] [أنتي-ي] بروتين خاصّة ، حيث [ي] يكون الجسم يرفع في حيوان لبروتينك الفائدة) إلى المادّة طافية وحضنت بين عشيّة وضحاها في 4 درجات [ك.].

8. أضفت 100 [أول] من [إيمّونوبرسبيتين] إلى عينات. بالتّعاقب أنت يستطيع استعملت [زسربين] ([إينفيتروجن]). (يتطلّب [زسربين] بعض تغيرات ثانويّة إلى البروتوكول)

9. نابذة في 13 ، 000 [ربم] ل 3 دقائق. أزلت المادّة طافية.

10. أضفت غسلت كريّة طينيّة 3 [إكس] مع 1 [مل] من باردة [إيب] غسل مصد (أنزيم بروتينيّ صادّ إلى [وه] مصد قبل إستعمال) مع يهزّ ل 5-10 دقائق بين كلّ [وش.].

11. استعملت هذا كريّة طينيّة أن يركض على [سدس-بج] هلام. أنت يستطيع أضفت [سدس] عينة مصد (بروتين تحميل مصد) إلى هذا وتحميل على هلام مباشرة بعد يغلي.

 

©2005 Molecularstation.com