[بيوينفورمتيكس] ، بروتوكولات ، [دنا] [رنا] بروتين [بروتيوميكس]

بيتيّة>[دنا]>[هيستون-ستلأيشن]>[إيندإكس.فب]

هستون [أستلأيشن]

علمت حول هستون [أستلأيشن].

هستون [أستلأيشن]

في 1964 فانسنت اكتشف [ألّفري] أنّ هستونات يستطيع كنت أسّست في على حدّ سواء [أستلت] و [أونستلتد] أشكال. يتلقّى ال [أستلت] أشكال [أستل] مجموعة يضاف إلى ال [أمينو غرووب] على ليزين [سد شين]. اكتشف [ألّفري] أيضا أنّ [أستلأيشن] يرتبط مع مورثة نشاط. [أونستلتد] يميل هستونات ، يضاف إلى [دنا] ، أن يكبت نسخة تسجيل ، بينما [أستلت] هستونات يكونون [ربرسّور] ضعيفة نسخة تسجيل. يتضمّن هذا نتيجات لذلك أنّ هناك أنزيمات في أنوية أنّ [أستلت] و [دستلت] هستونات ، ولذلك يأثر مورثة نشاط.

نجح جيمس [بروونلّ] ودايفيد [ألّيس] في 1996 في يعيّن وييصفّي هستون [أستلترنسفرس] (قبعة). قبعة أنزيم أنّ ينقل [أستل] مجموعة من معطاء ([أستل-كا]) إلى لبن هستونات. [إين وردر تو] بدأ عزلت هذا أنزيم [بروونلّ] و [ألّيس] مع [تترهمنا] ([سليتد] براي) خلايا لأنّ هذا كائن حيّ يتلقّى هستونات أنّ يكون بثقل [أستلت] ، أيّ يتضمّن أنّ هذا خلايا يحتوون تركيزات عال قبعة نسبيّا. هم أعدّوا مقتطفات من [مكرونوكلي] (الكبيرة [تترهمنا] أنوية أنّ يحتوي المورثات نشطة) وعرضهم إلى هلام إستشراد في [سدس] هلام يتشرّب مع هستونات. قبعة كشفت نشاط كان ب ينقع الهلام في حل ال [أستل-كا] مع علامة مميّزة إشعاعيّة في ال [أستل] مجموعة. إن الهلام احتوى نطاق مع قبعة نشاط ، نقل القبعة يعلم [أستل] مجموعة من [أستل-كا] إلى الهستونات. هذا خلق يعلم نطاق من [أستلت] هستونات في الهلام في الموقعة من [هتكتيفيتي]. أن يكشف ال يعلم هستونات ، غسل هم بعيدا ال [أستل-كا] [أونركتد] ، بعد ذلك عرض الهلام إلى [فلوروغرفي].

تبعت هذا تحقق أوّليّة من قبعة نشاط كان أبعد ب [ألّيس] وزميلات يستعمل جزيئيّة استنساخ تقنية أن يعلم أكثر حول [ب55] ومورثته. أولى صفّى هم القبعة نشاط أبعد ، يستعمل تقنيات معياريّة كيميائيّ حيويّ. ما إن هم صفّوا القبعة نشاط أساسا إلى تجانسية ، عزل هم كافي من هو أن ينال متحيّزة [أمينو سد] تسلسل. يستعمل هذا تسلسل صمّم هم مجموعة من [أليغنوكليوتيد] منحطّة أنّ رمّز لأجزاء من ال [أمينو سد] تسلسل ولذلك هجّن إلى ال [دنا] [مكرونوكلر] [جنوميك] (أو إلى [رنا] خلويّة). يستعمل هذا [أليغنوكليوتيد] بما أنّ كبسولة تفجير ، هم أنجزوا [بكر] ، بعد ذلك يستنسخ ال [بكر] منتوجات. هم نالوا التسلسل حقيرة من بعض من ال يستنسخ [بكر] منتوجات وفحصهم أن يدقّق أنّ الأجزاء داخليّة أيضا يرمّز ل يعرف قبعة [أمينو سد] تسلسل. يستنسخ لا شيء من ال [بكر] يحتوى [كدنس] كاملة ، هكذا هذا عاملات مدّدهم في على حدّ سواء ال 5 ' و3 ' اتّجاهات ، يستعمل الجنس إجراء أو تضخيم سريعة من [كدنا] نهايات. (أحلت جنس رسم بيانيّ لشرح بعيد).

استعمل [ألّيس] وزميلات يعدّد صيغة من هذا 5 ' جنس إجراء في أيّ هم حلقيّة ال [كدنا] لذلك هم استطاع استعملت كبسولة تفجير داخليّة ل على حدّ سواء أماميّة وعكسيّة [بكر] فتيل. سمحهم هذا خدعة أن يتفادى يذيّل ال 3 ' نهاية من الأولى طاق [كدنا] مع [ترنسفرس] طرفيّة. أخيرا ، نال هم [كدنا] أنسوخ أنّ رمّز ال يشبع 421 [أمينو سد] [ب55] بروتين.

ال [أمينو سد] كان تسلسل يستنتج من التسلسل حقيرة من ال [ب55] [كدنا] جدّا مماثلة إلى ال [أمينو سد] تسلسل من خميرة بروتين يدعى [غكن5ب]. عيّنت [غكن5ب] يتلقّى يكون كوسيطة من حامضيّة نسخة تسجيل منشطات مثل [غكن4ب] ، لذلك ال [أمينو سد] تسلسل تشابه اقترح أنّ على حدّ سواء ال [ب55] و [غكن5ب] [هتس] أنّ يكون تضمّنت في مورثة تنشيط. أن يدقّق أنّ يتلقّى [غكن5ب] قبعة نشاط ، [ألّيس] وزميلات عبّر عن مورثته في [إ.] [كلي] ، بعد ذلك يعرض هو و [ب55] إلى ال [سدس-بج] نشاط هلام فحص. كلا بروتينات يبدى واضحة قبعة نشاط. لذلك ، على الأقلّ يتلقّى واحدة قبعة ([غكن5ب]) على حدّ سواء قبعة ونسخة تسجيل [ك-كتيفتور] أنشطة. هو يظهر أن يلعب دور مباشرة في مورثة تنشيط ب [أستلت] هستونات.

[ب55] و [غكن5ب] نوع [هتس] (قبعة بما أنّ) أنّ يتواجد في النواة وظاهريّا تضمّنت في مورثة نظام تعديل. هم [أستلت] لبن هستونات على هم [لسن-ريش] [ن-ترمينل] ذيول. هذا [دوستثنكت] من نوع [ب] [هتس] (قبعة [بس]) أنّ يكون أسّست في الحشوة و [أستلت] حديثا يصطنع هستونات [ه3] و [ه4] لذلك هم يستطيع كنت جمّعت بشكل صحيح داخل [نوكليوسم]. ال [أستل] أضاف مجموعة ب [هت] [بس] يكون فيما بعد أزلت في النواة بهستون [دستلسس]. يحتوي كلّ يعرف قبعة بما أنّ ، بما في ذلك [ب55] و [غكن5ب] ، [برومودومين] ، بينما كلّ يعرف قبعة [بس] افتقار [برومودومين]. تضمّنت بما أنّ قبعة بما أنّ في [أستلت] هستونات في لونين ، غير أنّ قبعة [بس] ليس ، ال [برومودومين] يمكن ساعدت القبعة بما أنّ رباط إلى لونين.

رأيت ال [دنا] جزيء في [3-ديمنسونس]