كفلت/أعلنت & اقترنت إلى نا & اتّصل بنا & حول نا & ساعدتنا

علم الأحياء جزيئيّة [بلوغ]

أخيرة ساحة موقعات

 

[جنوميك] [دنا] عمليّة عزل بروتوكول

ينتقي [جنوميك] [دنا] تطهير طريقة

يعتمد الهدف من [جنوميك] [دنا] عمليّة عزل على ماذا التطبيقات من ال [دنا] بعد عمليّة عزل. نقاوة ، مصدر ، كمّيّة ونوعية ال [دنا] كلّ إصدارات أنّ يحتاج أن يكون خاطبت قبل [جنوميك] [دنا] إستخراج. مضيفة كاملة من طرق مختلفة ، تكنولوجيا وعدد يتوفّر الآن إلى باحثات أن يعزل [دنا] [جنوميك] من خلايا.

• احتاج كمّيّة ال [دنا]
• [مولكلر ويغت] وحجم ال [دنا]
• تطلّب نقاوة ال [دنا]
• تطبيقات منجرفة [دنا]
• [تيم فيلبل]
• سهولة من [دنا] إستخراج تقنية أو طريقة
• نفقة تكليف أو مال يتوفّر

منتج محليا أو مختبرة خاصّة [دنا] إستخراج يستعمل طرق غالبا الى حدّ بعيد جيّدا لمختبرات أنّ قد طوّرهم وبانتظام هذا بروتوكولات.

لاحظت مهما هذا طرق افتقار تقنين. أيضا ال [دنا] ليس عائد ماليّ و [دنا] نوعية دائما قابل للاستعادة من واحدة شخص إلى التالية.

خلفيّة على [جنوميك] [دنا] عمليّة عزل وتطهير

عموما ، يتضمّن كلّ طرق التمزيق وتفسخ الخلايا. هذا تبعت أحيانا بالإزالة ال [رنا] (ب [رنسس] ، ملح أو أخرى طرق). يختار الذي طريقة أن يستعمل سيعتمد على كثير إنتقاء عاملات بما في ذلك:

[دنا] عزلت من بروتينات ب عدّة طرق بما في ذلك هضم البروتينات بالأنزيم أنزيم بروتينيّ [ك.] بروتينات أزلت فيما بعد ب [سلتينغ-ووت] ، إستخراج عضويّة ، أو يقيّد من ال [دنا] إلى دعم [سليد-فس] (مثل [أنيون-إكسشنج] عمود أو سليكا تكنولوجيا).

استردّت [دنا] أخيرا بإيثانول ترسيب أو إيزوبروبانول ترسيب.

[إين جنرل,] الفصل ال [دنا] من خلايا وعناصر خلويّة يستطيع كنت قسمت داخل أربعة مراحل:

1. خلية تمزيق
2. تفسخ الخلية
3. إزالة من بروتينات وملوثات
4. إستعادة ال [دنا]

في بعض [جنوميك] [دنا] عمليّة عزل بروتوكولات ، ضممت مراحل 1 و2.

[متريلس] احتاجوا ل [جنوميك] [دنا] إستخراج طريقة

تفسخ مصد ل [جنوميك] [دنا] وصفة:

50 [مّ] [تريس-هكل] ، [ف] 8.0
[50مّ] [إدتا]
1% [سدس]
[10مّ] [نكل]

[جنوميك] [دنا] تطهير طريقة من نسيج عينات

1. انتقيت نسيج عينة أن يستعمل. تأكّدت أعدّت العينة بشكل صحيح وحافظت على جليد. إن العينة لن يكون سيستعمل فورا ل [دنا] إستخراج ، بعد ذلك العينات ينبغي كنت خزّنت بشكل صحيح في إمّا [-20ك] مجلد ل [لونجر-ترم] أو [4ك] لقصير المدى (قليل من ساعات) إستعمال.
2. قطعت نسيج داخل قطعات صغيرة. لا يقلق لكبدة أو أخرى نسيج ليّنة ، حول يجعل قطعات دقيقة.
3. أضفت نسيج إلى [بر-كولد] ([دري يس]) مدفع هاون ، فورا أضفت [ليقويد نيتروجن] [ن2].
4. بدأت أن يطحن نسيج داخل مسحوق دقيقة. أضفت كثير [ليق]. [ن2] بما أنّ يحتاج. نقلت مسحوق باردة إلى 30 [مل] أنابيب ، إذن يكشف لذلك [ن2] يستطيع تبدّدت.
5. أضفت 9 [مل] من [بر-ورمد] ([5ك]) تفسخ مصد وبلطف علقت مسحوق.
6. أضفت 100 [أول] من [10مغ/مل] من أنزيم بروتينيّ [ك] ، ([إي.] ، 100 [أوغ] في حل). حضنت [55ك] 1-18 ساعات. مزجت بلطف دوريّا. أضفت 100 [أول] من أنزيم بروتينيّ [ك] بعد أولى 2 ساعات ، درجة قصوى: 3 ساعات يضيف أنزيم بروتينيّ [ك] في 1.5 ساعات.
7. متعة عينة جدّا بلطف. أضفت 1 [مل] من [3م] [ن0ك] ([ف] 4.0) ، 10 [مل] من دافئة ([55ك]) فينول ، مزجت بلطف غير أنّ تماما ل 5-10 دقائق.
8. طردت عينات ل 15 دقائق.
9. كرّرت دافئة فينول إستخراج.
10. مقتطف مع يتماثل حجم ([10مل]) فينول: وكالة المخابرات الأمريكيّة (1 جزء فينول: 1 جزء وكالة المخابرات الأمريكيّة: [س] 23 أجزاء كلوروفورم: 1 جزء كحول إيزوأميليّة)
11. مقتطف مع يتماثل حجم ([10مل]) وكالة المخابرات الأمريكيّة إستخراج
12. [أوبّر فس] سوفت كنت نسبيّا واضحة ، إن هو يحتوي خرق كبيرة أبيض ، أو جدّا لبنيّة ، يحضن [(ي)] في [68ك] 15 [مين.] ، و [ر-فنول] مقتطف ، [(يي)] بداية ثانية ، غير أنّ يحضن طويلا مع [ب-ك].
13. إنتقال [أوبّر فس] إلى أنابيب جديدة. أضفت 2 حجوم من إيثانول باردة ومزجت بلطف (ملح: [ن0ك] سابقا في حل). [بيبت] يستعمل كلاب ويختم [بستيور] بكرة خارجا [دنا]. مسحت باتّجاه آخر إيثانول زائدة على الجانب من الأنابيب. علقت في 2-5 [ملس] ال [ت]. تأكّدت ذوّبت [دنا] تماما (إذن على رجّاجة لطيف.)
14. أضفت [رنس] مزيج (100 [أوغ] من [رنس] [ا] ، [10و] من [رنست1]). حضنت 30 [مين] [37ك.] ** أنت استطاع أضفت ال [رنس] قبل الأنزيم بروتينيّ [ك] ، حضنت في [37ك] ل 1 ساعة وبعد ذلك بدأت أنزيم بروتينيّ هضم. أنت استطاع بعد ذلك تخطّيت خطوة 15-.
15. أضفت 100 [أوغ] من أنزيم بروتينيّ [ك] ، [إينكب] [37ك] 30 دقائق.
16. أضفت 1/10 [فول.] [3م] [ن0ك] ، فينول مقتطف مرّة ، فينول: وكالة المخابرات الأمريكيّة مقتطف مرّتين ، وكالة المخابرات الأمريكيّة مقتطف مرّة.
17. أضفت 2.5 حجوم [إتوه] ، وضعت في [-20ك] 30 [مين.] نابذة 20 [مين.].
18. غسلت جيّدا مع 70% ، أزلت كلّ [إتوه]. إن أنت تنشّف ، يتمّ لا على جافّة.
19. علقت بعناية ، ببطء [إين1-2ملس] [ت] ([تريس-دتا] مصد). ([1إكس] أو [0.1إكس]).

 

 

 

أخرى [دنا] بروتوكولات وطرق

[دنا] استنساخ مرشدة

[دنا] هلام إستشراد

حصر أنزيم هضم - كلّ أنت تحتاج أن يعرف!

[جنوميك] [دنا] عمليّة عزل بروتوكول

[بستريا] [دنا] عمليّة عزل

يحتوي [دنا] تحويل - تاريخ ال [دنا]

وجدت أخرى بروتوكولات في نا [دنا] بروتوكولات خارجيّة موردة دليل أو يرى نا [دنا] بروتوكولات.

متّصلة:

[دنا] [ميكروأرّي] بروتوكولات

[بكر] بروتوكولات

 

[دنا] [بيوينفورمتيكس]

زيارة [دنا] [بيوينفورمتيكس].

 

أخبار [دن-رلتد]

[دنا] أخبار