خلية تفسخ طريقة بروتوكول

خلية تفسخ أو تمزيق خلويّة خلية علم الأحياء طريقة للإطلاق من جزيئات أحيائيّة بما في ذلك [أرغنلّ] ، بروتينات ، [دنا] ، [رنا] وأدهان [فروم ينسد] خلية.

ل كثير خلايا ، تناضح لطيفة عادة بكفاية إلى [لز] الخلايا. هذا أتمّت ب يخفّض ال [إيونيك سترنغث] من الحل محيط ، يسبّب الخلايا أن يتزايد وانفجار يطلق [كنتنتس] هم.

[سورفكتنس] لطيفة [أفتن وسد] [إين دّيأيشن تو] آليّة تفسخ طرق.

آليّة أو طبيعيّة تفسخ يتضمّن طرق:

• هيجان آليّة
• ضغطة
• [سنيكأيشن]
• نيتروجين قنبلة أو نيتروجين انفجار تفسخ طريقة
• ما فوق الصّوت مع تحقيقات صغيرة

أوصلت هذا [ستبس] أن يضمن كاملة يتفكّك من الخلية وعناصره خلويّة بما في ذلك عطل من [أرغنلّر] وأغشية نوويّة.

واجبة إلى التكاليف عال من ينمو خلايا ، عادة فقط [سملّ موونت] من مادة خلويّة يتوفّر. هو لذلك ضروريّة أن يكون فعّالة عندما [لز] خلايا أن يضمن الحد من مادة [أوسبل] نلت. غالبا ، استعملت عدّة طرق في إدماج أن يضمن تفسخ كاملة تقريبا.

خلية تفسخ حيويّة للإستخراج من [دنا] ، [رنا] وبروتينات من خلايا. لذلك ، احتجت هو في كثير خلية علم الأحياء تقنيات وحتّى جزيئيّة علم الأحياء تقنيات.

خلية حددت تفسخ في إستعماله بما أنّ هو يتطلّب الخلية غشاء أن يكون اخترقت وخلية [كنتنتس] أن يكون أطلقت. يموت هذا [لز] خلايا ويستطيع لا يكون استنبتت أو نمات ثانية.

هناك كثير عاملات أن يعتبر الذي خلية تفسخ طريقة أن يستعمل أو كيف أن يوصل هو.

حجم الخلايا

المبلغة الخلايا أن [لز] معلمة مهمّة في خلية تفسخ. إن أنت فقط تتلقّى جدّا

إن فقط [ا فو] [ميكروليتر] العينة يكونون يتوفّر ، عناية ينبغي كنت أخذت أن يقلّد خسارة وأن يتفادى [كروسّ-كنتمينأيشن].

تمزيق الخلايا ، عندما عالجت مئات [أر فن] آلاف ال [ليتر] المادة يكون في إنتاج بيرة ، يقدّم تحدي مختلفة. صبيب ، فعالية ، وإمكانيّة استنساخ عاملات أساسيّة.

رقم من خلية عينات إلى [لز]

غالبا هناك كثير خلية عينات إلى [لز]. هناك كثير إصدارات أن يعتبر عندما يتمّ هذا بما في ذلك [كروسّ كنتمينأيشن] العينات ، السرعة من يعالج ، وتجهيز تنظيف بعد كلّ عينة يكون [لز].

صعوبة الخلايا إلى [لز]

بعض خلايا الى حدّ بعيد يصعب أن [لز]. بما أنّ التفسخ صعوبة يزيد ، عظيمة تفسخ تطلّبت قوة أو [إيونيك سترنغث] [هيغر] مصدات أن بفعّاليّة عطّلت الخلايا.

لأكثر يصعب تفسخ من خلية عينات مثل خميرة عينات ، هناك زيادة شديد انحدار في ال [بروسسّ بوور] ، وقت وتكلفة يتطلّب.

ل ال أكثر يصعب عينات إلى [لز] ، مثل بوغ جرثوميّة ، يتطلّب هذا قوات آليّة يضمّ مع كيميائيّ أو جهود أنزيميّة. المشكلة يتساوى مع يتعدّد ويحقّق طرق [هرشر] ، عادة واحدة محدودة تمزيق فعالية.

فعالية من خلية تفسخ

[دبندينغ ون] ما جزء من الخلية ، [فركأيشن] [أرغنلّ] أو أنت حاجة أن يعزل ، [أفر-لسس] يمكن أثرت ك ب رغب منتوج.

إن تجزئة [سوبسلّولر] يكون استعملت ، هو أكثر مهمّة أن يتلقّى تفسخ دقيقة أن يحقّق مصونة [سوبسلّولر] [أرغنلّ] عناصر. بوضوح ، سيحقّق أنت فعالية [لوور] تفسخ ولذلك سيتطلّب كثير خلايا. أن يدرّج هذا خلية تفسخ [بروسسّسّس] ، يصبح الوقت أن يعطّل الخلايا والإمكانيّة استنساخ من الطريقة أكثر عمال مهمّة.

خلية تفسخ [فس] جزيء أن يكون عزلت

هو جدّا مهمّة أن يموّن التفسخ طريقة إلى البروتين أنت تحتاج يعزل. اهتمّت إن هو يكون بروتين نوويّة ، تطلّبت أن [لز] الخلية أولى وبعد ذلك عزلت الغشاء نوويّة. عقب عزلت الغشاء نوويّة ، بعد ذلك واحدة يمكن [لز] الغشاء نوويّة وأطلقت الجزيء الفائدة. ينخفض هذا منهجيّة التلوث الجزيئات أنّ يكون من أخرى خلويّة أرض محصورة/[أرغنلّ].

علاوة على ذلك ، [دبندينغ ون] الجزيء عناية ينبغي كنت أخذت إلى إستعمال أو لا إستعمال مؤكّدة تفسخ حلول أو طرق. مثلا ، إن أنت يكون تحاول أن يعزل [فوسفو-بروتين] أنّ يكون حسّاسة إلى فوسفتاز ، ليس هو فكرة جيّدة أن [لز] وعرضت ال [فوسفو-بروتين] إلى آلاف من أنزيم بروتينيّ وفوسفتاز أنزيمات. يحمي جزيءك من قاسية أو شروط أنزيميّة مهمّة. الدرجة حرارة ([لوو تمبرتثر] التفسخ) ، وإستعمال من جزيئات مانعة (مثل أنزيم بروتينيّ وفوسفتاز صادّ) مهمّة في هذا تفسخ حالات.