كفلت/أعلنت & اقترنت إلى نا & اتّصل بنا & حول نا & ساعدتنا

علم الأحياء جزيئيّة [بلوغ]

أخيرة ساحة موقعات

 

[أغروس] هلام إستشراد

هذا [أغروس] هلام إستشراد موقعة مدخلك لكلّ أشياء يرتبط إلى ال [أغروس] هلام إستشراد تقنية وتحليله. نحن نزوّد أنت مع [ألّ ث] [بكغرووند ينفورمأيشن] ، بروتوكولات ، تحليل [ستبس] ، تصور ويتحرّى معلومة لجارية [أغروس] هلامات ل [دنا] ، [رنا] أو بروتين أن يصبح الخبيرة نهائيّة في [أغروس] هلام إستشراد!

[أغروس] هلام إستشراد [تبل وف كنتنتس]

• ماذا يكون [أغروس] هلام إستشراد ؟
• خلفيّة
• تطبيقات
• [متريلس]
• مصدات
• هجرة
• يحلّ حدود من [أغروس] هلامات
  
• تحضير
• بروتوكول
• تصور
• هلام تحليل
• [أغروس] هلام إستشراد [فيديوس]
• أخرى [أغروس] هلام إستشراد بروتوكولات
• يتحرّى [أغروس] هلامات
• نقاشة مواضيع ل [أغروس] هلام إستشراد
• حصلت مساعدة على ك [أغروس] هلام مشكلة

ماذا يكون [أغروس] هلام إستشراد ؟

[أغروس] هلام إستشراد طريقة يستعمل في كيمياء حيويّة وعلم الأحياء جزيئيّة أن يفصل [دنا] ، أو [رنا] جزيئات بحجم مهما بروتينات يستطيع أيضا كنت فصلت على [أغروس] هلامات. حقّقت فصل من الجزيئات ب يتحرّك سلبيّا يحمّل [نوكليك سد] جزيئات من خلال [أغروس] مادّة ترابط في [إلكتريك فيلد] (يرى إستشراد). يتحرّك جزيئات قصيرة [فستر] ويهاجر أبعد من طويلا أحد.

 

 

تطبيقات من [أغروس] هلام إستشراد

[أغروس] هلام استعملت إستشراد في الدّرجة الأولى في تحليل أو فصل من [دنا] و [رنا] جزيئات (رغم أنّ بروتينات يستطيع أيضا كنت فصلت على [أغروس] هلامات) ، ولكن فصل أيضا يسمح التطهير من حجوم خاصّة [دنس] بعد حصر أنزيم هضم. استعملت هذا عادة في يستنسخ أن ينال قطعة [بلسميد] ، في أيّ [أغروس] هلام إستشراد يفصل قطعة متجهات من غير مختصر أحد.

لذلك [أغروس] يسمح هلامات:

1. هضم فصل من حصر أنزيم [دنا] بما في ذلك [دنا] [جنوميك] ، قبل جنوبيّة لطخة إنتقال. هو أيضا [أفتن وسد] ل يفصل [رنا] قبل إنتقال شماليّة.
2. تحليل من [بكر] منتوجات بعد [بولمرس] [شين ركأيشن] أن يقدّم لهدف [دنا] تضخيم.
3. يسمح للتقدير من الحجم من [دنا] جزيئات يستعمل [دنا] علامة أو سلم أيّ يحتوي [دنا] [فرغمنتس] من مختلفة يعرف حجوم.
4. يسمح التقدير خشنة من [دنا] كمّيّة ونوعية.
5. كمّيّة قدّمت يستعمل [لمبدا] [دنا] سلم أيّ يحتوي مبلغات خاصّة [دنا] في نطق مختلفة.
6. قدّمت نوعية ال [دنا] ب يلاحظ الغياب من يخطّط أو [فرغمنتس] (أو يلوّن [دنا] نطق).
7. أخرى يعتمد تقنيات على [أغروس] هلام إستشراد ل [دنا] فصل بما في ذلك [دنا] بصمة إصبع.

يهلّم ميزات وسيئات ال [أغروس] إستشراد

الميزات أنّ صببت الهلام بسهولة ، لا يشوّه العينات. العينات يستطيع أيضا كنت استردّت.

السيئات أنّ هلامات يستطيع ذبت أثناء إستشراد ، المصد يستطيع أصبحت يستنزف ، وأشكال مختلفة من مادة وراثيّة يمكن ركضت في أشكال مستحال تنبّؤ.

هجرة في [أغروس] هلامات

العاملة مهمّ أكثر الطول من ال [دنا] جزيء ، جزيئات صغيرة يسافر [فرثر]. غير أنّ تكيف من ال [دنا] جزيء أيضا عاملة. فصلت أن يتفادى هذا مشكلة جزيئات خطيّة عادة ، عادة [دنا] [فرغمنتس] من حصر ملخص ، خطيّة [دنا] [بكر] منتوجات ، أو [رنس].

يقلّد يزيد ال [أغروس] تركيز من هلام الهجرة سرعة ويمكّن فصل من صغيرة [دنا] جزيئات. ال [هيغر] الجهد فلطيّ ، ال [فستر] يهاجر ال [دنا]. غير أنّ حددت جهد فلطيّ بالحقيقة أنّ هو يسخّن وأخيرا يسبّب الهلام أن يذوب. ينخفض جهد فلطيّ عال أيضا القرار (فوق حوالي 5 [تو] 8 [ف/كم]). [دعوة قضائيّة يحتاج]

سيتحرّك [كنفورمأيشنس] من [دنا] [بلسميد] أنّ يتلقّى لم يكن قطعت مع حصر أنزيم مع سرعات مختلفة (بطيئة إلى [فستست]): فتحت يثلّم أو دائريّ ، خطّ ، أو [سوبركيلد] [بلسميد].

يحلّ حدود من [أغروس] هلامات

[أغروس] هلامات يستطيع كنت استعملت للفصل من [دنا] [فرغمنتس] يتراوح من 50 أزواج حقيرة إلى عدّة [مغبسس] (ملايين الأسس) بإستشراد. [مور كمّونلي] مهما ، [أغروس] هلام استعملت إستشراد أن يفصل [دنا] من [بكر] واستنساخ في المدى ال [100بب] إلى حوالي [15كب]. [رونتيم] حوالي 30 دقائق - 1 ساعة طويلة.

صغيرة فصلت [دنس] أو [رنس] (صغيرة من [100بب]) على نحو أفضل ب [بولكرلميد جل] ، ولكن 2-3% [أغروس] هلامات يمكن كنت كافية أن يفصل حتّى [50بب] [فرغمنتس] من كثير [نوكليك سد] كبيرة.

مؤخّرا مهما ، أبديت هو يتلقّى يكون أنّ [أوب تو] واحدة حقيرة زوج حجم فرق استطاع كنت حللت على 3% [أغروس] هلام مع منخفضة موصلية وسط جدّا مثل 1 [مّ] عنصر ليثيوم ملح بورات ([برودي] [جر] ، [كلهوون] [إس] ، [غلّمير] [إ] ، [كرفلّ] [تد] ، كيون [س] (2004). [أولتر-فست] [هيغ-رسلوأيشن] [أغروس] إستشراد من [دنا] و [رنا] يستعمل أوساط [لوو-مولريتي] موصلة. [بيوتشنيقوس]. 37:598 - 602.).

 

طاولة من [أغروس] هلام نسبة مئويّة ومدى فعّالة فصل:

بما أنّ أنت يستطيع رأيت منخفضة نسبة مئويّة [أغروس] هلامات جيّدة للفصل من كبيرة [دنا] جزيئات ، حيث أنّ [هيغر] نسبة مئويّة هلامات جيّدة ل [دنس] صغيرة.

 

[دنا] تطهير مع [أغروس] هلام إستخراج

بما أنّ يذكر قبل ، [أغروس] هلام يسمح إستشراد الفصل ولذلك التطهير ال [دنا] لاستنساخ. مهما ، يتطلّب هذا عادة [هي بوريتي] منخفضة انصهار [أغروس] إن ال [دنا] يكون أن يكون استخرجت من الهلام.

[أغروس] هلام إستشراد مصدات

[إلكتروفورسد] [دبندينغ ون] الحجم من ال [دنا] والتطبيق ، مصدات مختلفة يستطيع كنت استعملت ل [أغروس] إستشراد. [ت] مصد (أو [تريس] [أستت] [إدتا]) ال أكثر عاديّة يستعمل [أغروس] هلام إستشراد مصد. [ت] يتلقّى ال [بوفّرينغ كبستي] منخفضة من المصدات ، ولكن يقدّم [ت] القرار جيّدة ل [دنا] كبيرة. مهما ، يتطلّب [ت] [لوور فولتج] وكثير وقت.

مهما [تب] مصد ([تريس/بورت/دتا]) [أفتن وسد] لصغيرة [دنا] [فرغمنتس] ([إي] بعض من [500بب]).

 

[سديوم بورت] أو [سب] مصد مصد جديدة ، ولكن هو غيرفعّال ل يحلّ [فرغمنتس] [لرجر] من 5 [كب]. مهما يتلقّى [سب] ميزات في موصليته منخفضة ، يسمح جهد فلطيّ [هيغر] ([أوب تو] 35 [ف/كم]). هذا استطاع سمحت [أنلسس تيم] قصيرة لإستشراد روتينيّة.